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      Pfu DNA

      描述:Pfu DNA,代理,上海代理,北京代理,,總代理,國內代理

      更新時間:2016-12-22
      訪問次數:1993
      廠商性質:代理商
      詳情介紹

      目錄號規格備注價格說明書下載
      E002-01A250U含dNTP230元
      E002-01BA包裝×5含dNTP1035元
      E002-02A250U不含dNTP 180元
      E002-02BA包裝×5不含dNTP 810元
       

      · Pfu DNA 聚合酶內容 (250 U)

      Pfu DNA聚合酶(5 U/μl)50 μl
      dNTP 混合液 (各10 mM)250 μl
      10 × Pfu Buffer with Mg2+1 ml

       

      · 聚合酶說明 
      本酶為Pyrococcus furiosus中分離的pfu DNA pol 基因在大腸桿菌中進行表達后經多次純化分離而得。聚合酶具有3’-5’外切酶(校正)活性,當聚合反應發生堿基錯配時,聚合酶的校正活性可將錯配的堿基切除。聚合酶為使用范圍zui廣的高保真DNA聚合酶,其錯誤率僅為1.3x10-6,推薦聚合酶用于需高保真的PCR反應。 

      · 聚合酶用途 
      用于要求保真度比較高的PCR反應,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突變、全基因合成等(參見 Sinobio 實驗方案)。 

      · 聚合酶產品特點 
      高保真:聚合酶是使用zui廣泛的高保真酶,其保真度為普通Taq酶的10倍。
      靈敏:可從0.05ng人基因組DNA模板中擴增出特定基因片段(圖例一)。
      快捷:PCR反應所必需試劑全集于一管之中,數分鐘即可完成反應體系配置。
      便利:10μl, 25μl 或50μl體系全部適用。 

      · 質量保證 
      經多次柱純化,SDS-PAGE檢測純度大于95%;
      PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留,無核酸內、外切酶污染。 

      · 聚合酶使用建議

      聚合酶產生的PCR產物為平滑末端,無3’端"A"突出,其PCR產物的克隆有兩種方案。
      1. PCR前引物進行5’端加磷修飾或將PCR產物磷酸化處理后再直接克隆于平滑末端的載體中(參見 Sinobio實驗方案)。
      2. 將產物3’末端加A后再與T-Vector連接(參見 Sinobio 實驗方案)。
      3. 由于聚合酶的校對活性可引起引物從3′端被部分降解。因此在設計引物時應適當增加引物的長度,理想的引物長度為20-30堿基。另外為了減少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解,盡量在冰上配置反應體系,并zui后加入Pfu酶。

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